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免疫学检验
一、下丘脑—垂体功能试验
1.促甲状腺激素释放激素(TRH)兴奋试验
 
方法:
 
①病人禁早餐,在休息的情况下进行试验。
 
②TRH250~500μg溶于2~4ml生理盐水内,快速静脉注射或TRH鼻喷雾剂200μg,每只鼻孔喷100μg
 
③于试验前及用药后15、30、60、90或120分钟,分别抽血测TSH水平(病情需要时可测定每小时T3、T4连续4次)目前常用注射TRH后30分钟一次抽血法。
 
临床意义:
 
①正常人TSH基础值<10μU/ml,注射TRH30分钟,血清TSH出现高峰值(可达正常基础值2~3倍),1~3小时内迅速降至基础水平,最高值在10~30μU/ml。
 
②原发性甲减 基础值增高,TRH刺激后TSH呈过度反应,峰值可达基础值的5~倍。
 

③继发性甲减(垂体性)基础值水平不能测得,TRH刺激后几乎无反应。

 
④下丘脑性甲减时表现为延迟反应,即TSH峰值在60或90分钟时出现。
 
⑤甲状腺功能亢进时对TRH无反应。
2.长生激素分泌兴奋试验(精氨酸兴奋试验)
 
方法:
 
①晚8时后禁食过夜,次时早晨卧床情况下进行。抽血查基础生长激素。
 
②盐酸精氨酸0.5g/kg体重,以注射用水稀释至总量为200ml,30分钟内滴完。
 
③滴药后30、60、90和120分钟,从另一上肢抽血测生长激素。
 
临床意义:
 
①正常人生长激素升高至少达到7μg/L或比基础值升高3倍,其峰值在60~120分钟。
 
②生长激素储备不足时峰值<7μg/L,常用于矮小症和侏儒症的诊断。
 
注意事项:
 
①严重肝、肾疾病或糖尿病伴酸中毒时应慎用精氨酸。
 
②注射时如溶液漏于皮下,可引起局部组织红肿痛反应,应予避免。
3.葡萄糖抑制生长激素试验
 
方法:
 
①8时后禁食,次日晨于卧床情况下进行。
 
②葡萄糖100g溶于300ml水中或50%葡萄糖液200ml加水稀释至300ml,一次口服。
 
③服糖前及服糖后30、6、90和120分钟抽血测血糖和生长激素。
 
临床意义:
 
①正常人服糖60分钟时生长激素值下降,低于5μg/L~1μg/L。
 
②肢端肥大症或巨人症患者生长激素为自主性分泌,不完全受高血糖所抑制,其抑制率<50%。部分患者有生长激素反常升高反应。
 
注意事项:空腹血糖>8.8mmol/L时不宜行此项检查。
4.泌乳素(PRL)兴奋试验(甲氧普胺兴奋试验)
 
方法:
 
①清晨空腹基础状态下进行,先抽血测PRL基础值。
 
②甲氧普胺(甲复安)10mg肌注,给药后30、6、90和120分钟抽血查PRL。
 
临床意义:
 
①正常人给药90分钟后出现峰值,较基础值增加3倍以上或峰/基比值>2.5,功能性高催乳素血症患者反应与正常人相似。
 
②PRL瘤患者无反应或反应延迟,基峰/基比值<1.5。
 
注意事项:
 
禁用影响催乳素分泌的药物。雌激素、多巴胺受体阻滞剂(如利血平、甲基多巴、氟哌丁苯、酚噻嗪类)和H2受体阻滞剂(如甲氰咪呱)可增加催乳素分泌;多巴胺受体增效剂(如左旋多巴、溴隐亭和阿扑吗啡)使催乳素分泌减少。
5.泌乳素(PRL)分泌抑制试验
 
(左旋多巴、溴隐亭或水负荷法
 
方法:
 
①测空腹安静状态下PRL基础值,然后给予左旋多巴500mg口服。试验期间卧床。
 
②服药后3小时再次抽血查PRL。
 
③还可用水负荷法(30分钟内饮水20ml/kg体重)或溴隐亭(2.5mg口服)作抑制试验,意义与左旋多巴试验相同。
 
临床意义:
 
①正常人服药3小时后PRL抑制可达0.16nmol/L以下或较基础值减少50%以上。
 
②泌乳素瘤患者基础值常高于4nmol/L,且不被左旋多巴抑制。
 
注意事项:
 
①禁用影响PRL分泌的药物。
 
②试验期间避免刺激乳房。
 
③少数患者服药后有恶心、眩晕等症状。
 
④心脏病患者应慎用此法。
6.促皮质素释放激素(CRH)兴奋试验
 
方法:
 
①清晨空腹安静状态下抽血查ACTH和皮质醇,然后给予CRH1μg/kg体重静脉注射。
 
②注射后15、30、60和90分钟抽血查ACTH和皮质醇。
 
临床意义:
 
①正常人15分钟可出现ACTH分泌增高,皮质醇高峰在30~60分钟。
 
②垂体ACTH分泌细胞破坏所臻继发性肾上腺皮质机能减退患者对CRH兴奋试验无反应。
 
③下丘脑病变患者为延迟反应。
 
④原发性肾上腺皮质功能减退时ACTH基础值增高,并对CRH刺激反应过强。
 
⑤异位ACTH分泌综合征时肿瘤自主性分泌ACTH,可对本试验无反应。
 
注意事项:
 
①部分患者注射后出现颜面潮红,或呼吸急促,脉搏增快及低血压等。
 
②试验前2周停用肾上腺皮质激素或影响肾上腺、脑垂体分泌功能的药物。
7.抗利尿激素分泌功能试验(禁饮—血管加压素试验)
 
方法:
 
①试验前先测体重、血压、尿渗透压。
 
②禁饮时间视病人多尿程度而定,一般试验前晚8~10pm开始禁饮,尿量大于10000ml24小时者,可于清晨0点或2Am开始禁饮。
 
③试验日晨6Am起每小时留尿,测尿量、比重和尿渗透压,同时测体重和血压,当尿渗透压(或尿比重)达到平顶,即继续禁饮不再增加尿量时,此时再抽血测血渗透压、尿渗透压,然后皮下注射血管加压素5U,注射后仍继续每小时的留尿,测尿量、尿比重、尿渗透压共二次,停止试验。
 
④病人禁饮的时间8~18小时,但如病人排尿量甚多,虽禁饮不到18小时,体重已较原来下降3~5%或血压明显下降,也应停止试验。
 
结果:
 
①正常人不出现明显的脱水症状,禁饮后尿量明显减少,尿比重>1.020,尿渗透压一般>800mOsm/L。
 
②神经性烦渴,禁饮前尿比重低,尿渗透压<血渗透压,禁饮-加压素反应如正常人。
 
③肾性尿崩症,注射血管加压素反尿量不减少,尿比重、渗透压不增加。
 
④中枢性尿崩症病人禁饮后尿量仍高,尿比重多数<1.010,尿渗透压<血渗透压,部分轻型患者,尿比重有时可>1.015,但<1.020。尿渗透压>血渗透压,但注射血管加压素后,尿渗透压明显增加,轻型者部分性尿崩症尿渗透压增加达注射前的10%~50%,重者(完全性尿崩症)达50%以上。
二、甲状腺功能试验
1.基础代谢率(BMR)检测
 
方法:
 
①试验前日晚餐后禁食,保持正常睡眠,试验日晨禁食,最好少活动、少讲话,排空小便后卧床。
 
②如系门诊患者,来院后静卧约1小时后检查。
 
③开始仪器检测前应向患者详细讲解经过和注意事项,避免患者因不必要的顾虑或紧张影响结果。
 
④如仪器检测法结果不满意或不具备时,可用简易计算法:
 
BMR=(脉率+脉压)-111
 
BMR=0.75×(脉率+脉压×0.74)-72
 
临床意义:
 
①正常人BMR在-10%~+15%之间
 
②甲亢患者常增高,根据BMR增高情况分为:
 
轻度+15%~+30%
 
中度+30%~+60%
 
重度>60%
 
发热、严重贫血、心力衰竭及嗜铬细胞瘤时亦可增高。
 
③BMR减低常见于甲状腺功能减退症,其次可见于Addison's病;营养不良或严重水肿患者。
 
注意事项:
 
①检查前2周停用影响甲状腺功能的药物,如抗甲状腺药物或甲状腺片等。
 
②发热时不查。
 
③鼓膜穿孔者,由于耳部漏气,有引起BMR增高的报道(仪器检测受影响,可用简易计算法)。
 
④简易计算法,可用于门诊治疗,疗效评估。
2.促甲状腺激素释放激素兴奋试验
3.甲状腺摄131碘率
 
方法:清晨空腹131碘化钠2微居里,测2小时及24小时摄131碘率。
 
结果:高峰多在24小时出现
   
2小时平均值 5.7% ~24.5%
   
24小时平均值 15.1%~47.1%
4. 三碘甲状腺原氨酸抑制试验(T3抑制试验)
 
方法:
 
①先测基础摄131碘率。
 
②口服T320μg第日三次,连续6d(或甲状腺片60mg, 每日三次,连服8d),然后再做摄131碘率对比二次结果。
 
③服药后甲状腺摄131碘率明显下降,抑制率>50%为正常。
 
临床意义:
 
①正常人及单纯性甲状腺肿患者服药后抑制率>50%。
 
②甲亢患者和内分泌性突眼症及甲状腺热结节患者往往不能被抑制,抑制率<50%为异常。
 
③可做为判断长期抗甲状腺药物治疗后是否复发的参考指标,抑制率<50%提示复发可能。
 
注意事项:
 
①妊娠及哺乳期禁用此法。
 
②有高血压、冠心病史的患者或有心房纤颤和心力衰竭者禁用。应用TRH兴奋试验。
 
③试验前二周禁用含碘食物、药物及用影响甲状腺功能的其他药物。
三、肾上腺功能试验
1.促肾上腺皮质激素(ACTH)兴奋试验
  方法:
  ①8小时静滴法:试验前空腹静息时抽血测血皮质醇和/或收集24小时尿,测尿游离皮质醇(或17-O-HCS和17-KS),ACTH25单位加于5%葡萄糖溶液500ml内,静脉滴维持8小时(平均16滴/分)滴注后,1小时、4小时和滴完后抽血测皮质醇,收集试验24小时尿测尿游离皮质醇(或17-OHCS和17-KS)。
  ②快速法:晨8时空腹抽血测血皮质醇基础值,静滴ACTH25单位,注射后30分钟和60分钟抽血检测皮质醇。
  临床意义:
  ①正常人给予ACTH后使皮质醇升高达基础值2~5倍,24小时尿17-OHCS和17-KS为1~3倍。
  ②原发性肾上腺皮质功能减退症,血、尿皮质醇不升高,可了解其储备功能。
  ③继发性肾上腺皮质功能减退症,表现为延迟反应一般静滴4小时以后才逐渐升高。
  ④库欣病,双侧肾上腺皮质增生,皮质醇过度升高,而肾上腺瘤时升高不明显,了解肾上腺增生和肿瘤有一定意义。
  注意事项:
  ①疑肾上腺皮质功能异常时先行快速法检查,如无反应可行8小时静脉滴注。
  ②重症原发性肾上腺皮质功能减退症病人行本试验时易致危象发生,可以先给予地塞米松0.5mg或强的松龙5mg口服,不影响试验结果。
  ③长期服用糖皮质激素的病人可引起肾上腺皮质萎缩,皮质醇同样不升高,这种情况下可将8小时法延长至3~8天。
2.地塞米松抑制试验
  方法:
  ①小剂量地塞米松抑制试验
  午夜法:
    试验日早上8时抽血备查,晚上11时口服地塞米松1mg,次日晨8时抽血查ACTH和皮质醇。
    正常人或单纯性肥胖者,服药后血浆总皮质醇<4μg/dl,或比服药前下降>70%;皮质醇增多症患者不受抑制或比服药前下降<70%。皮质醇增多症患者不受抑制或比服药前下降<70%。
  两日法:
    对照日晨8时抽血及留24小时尿备查。然后给予地塞米松0.5mg,每6小时一次口服,连服2天,第二天抽血及留24小时尿查皮质醇。
    正常人及单纯肥胖者其抑制率>基础值50%以上,或绝对值<5μg/dl;皮质醇增多症患者抑制<50%。
  ②大剂量地塞米松抑制试验:用来对不被小剂量地塞米松抑制的患者,鉴别皮醇增多症的病因。
  午夜法:
    留取标本时间及检测项目同小剂量法;地塞米松8mg,午夜11~12时一次口服。
    肾上腺皮质激素增生患者血皮质醇可抑制到基础值的50%,腺瘤因自主分泌可不受抑制或轻度受抑。
  两日法:
    抽血留标本时间及检测项目同小剂量法;地塞米松2mg,每6小时一次口服,连服两天。
    皮肤上腺皮质增生比对照日抑制率>50%,肾上腺皮质肿瘤或异位ACTH综合征患者与对照日抑制率<50%。
  注意事项:
  ①试验前1周内停用ACTH、皮质激素、口服避孕药、雌激素、抗癫痫药及中枢兴奋或抑制药。
  ②小剂量和大剂量抑制法亦可用24小时尿17-O-HCS,17-KS排泄量,计算抑制率。正常时降低值超过原来对照值的50%,大剂量被抑制≤50%为增生,>50%者肿瘤多见。
3.安体舒通试验
  方法:安体舒通(微粒型)320~400mg/d分3~4次连服1~2周,于服药前,后各二日,测定血钾、钠及24小时尿钾、钠,血压。
  正常结果:血、24小时尿钾、钠,血压于服药前后无明显变化。
  临床意义:若服药后血压下降,并血钾上升甚至接近正常,以及尿钾下降提示原发性醛固酮增多症。
4.酚妥拉明阻滞试验(Regitin试验)
  方法:
  ①用苄胺唑啉5mg静脉推注。
  ②推注前嘱病人静卧45分钟以上,连续3次以上血压平稳且维持在22/15.kPa以上。
  ③推注后最初3分钟内每0.5至1分钟测血压,以后每1~2分钟测血压1次共15分钟。
  阳性结果:静脉注射后2~3分钟内血压降下较注射前低4.5/3.5kPa以上并维持此水平3~5分钟以上。
  临床意义:阳性者嗜铬细胞瘤可能性大,鉴别于原发性高血压。
5.可乐定试验(Clonidine试验)
  方法:抽血测基础状态下血儿茶酚胺,口服氯压定0.3mg,服药前、后2~3小时测血儿茶酚胺。
  临床意义:氯压定能抑制神经原性因素所引起的儿茶酚胺释放而对嗜铬细胞瘤患者升高的儿茶酚胺无明显抑制作用。
6.组绢胺激发试验
  方法:
  ①先作冷加压试验,冷加压前后作血压测定,待血压回复至冷加压前水平。
  ②将磷酸组织胺0.07~0.14mg(相当组织胺基质0.025~0.05mg)加入2ml/生理盐水迅速静注(一般先用0.01mg)亦可用胰高糖素0.5~1mg激发试验)
  ③注射完后每分钟测量同侧上壁血压共5次,以后每2分钟测1次且至恢复基础血压。
  临床意义:
  ①用于嗜铬细胞瘤,高血压非发作期进一步检查。
  ②静注后较静注前血压升8.0/4.0kPa或血压较冷加压试验时的最高血压升高2.5/1.5kPa以上。为阳性结果。
  注意事项:
  ①试验前一周内停用所有降压药物,前二天停用镇静类药。
  ②本试验有诱发心力衰竭或脑血管意外的危险。若年龄较大或原来血压偏高(>23/13kPa)的患者,不宜行此试验。试验前备好苄胺唑啉以应急需。
  ③试验开始前建立静脉输液通道,以5%葡萄糖溶液缓滴,以便于给药。
  ④有哮喘或过敏性病史者禁忌。
  ⑤本试验假阳性10%左右,应注意鉴别。
四、胰岛功能试验
1.口服葡萄糖耐量试验(OGTT)
  方法:
  ①试验前,三天给予正常饮食,碳水化合物量不少于300克/d,以免因饥饿状态,影响OGTT的结果。
  ②试验日前晚8pm禁食。
  ③试验日在服用葡萄糖液前抽取空腹血糖。
  ④试验用葡萄糖75克,溶于250ml温开水,顿服,服后30、60、120、180分钟各抽取血糖测试。
  正常结果:空腹血糖(FBG)<6.1mmol/L;餐后2小时血糖(PBG2h)<7.8mmol/L
  临床意义:
  ①诊断糖尿病、糖耐量异常(IGT)和空腹血糖异常(IFG)。
 
空腹血糖
  餐后2小时血糖
 
(mmol/L)
  (mmol/L)
 
DM≥7.0
  ≥11.1
 
IGT>6.1~<7.0
  >7.8~<11.1
 
IFG>6.1~<7.0
   
  ②单纯性肥胖者OGTT可呈减低。
  ③肢端肥大症、甲亢者OGTT常呈减低。
  ④席汉综合征、阿狄森病OGTT呈低平曲线。
2.馒头餐试验
  方法:用2两(100g)精白面粉制成馒头,替代75g葡萄糖,其他与OGTT相同。
  注意事项:
  ①糖尿病患者不宜饮用葡萄糖液负荷,可用馒头(100g面粉)替代,相当于75g葡萄糖量。
  ②其诊断标准与葡萄糖耐量试验相同。
3.胰岛素释放试验
  方法:同OGTT(试验餐可用75g葡萄糖,糖尿病人用馒头餐(100g面粉)每次抽血糖标本同时抽一份血清测胰岛素。
  正常结果:空腹5~20μU/ml(mU/L);餐后1小时,为空腹5~6倍;餐后2小时为空腹4~5倍;餐后3小时为空腹2.5~3倍。
  临床意义:
  ①了解胰岛β细胞的胰岛素储备功能,有助于Ⅰ型、Ⅱ型的分型。
  ②Ⅰ型糖尿病胰岛素释放呈低平曲线,各时限胰岛素浓度与空腹时无明显增高。
  ③Ⅱ型糖尿病胰岛素释放延缓,峰值后延。
五、钙调节激素试验
1.依地酸钠兴奋试验
  方法:
  ①试验日晨抽血测游离钙。
  ②静脉滴注依地酸钠50~70mg,滴注时间30分钟以上。
  ③滴注后4、8、12和24小时分别抽血测定游离钙。
  临床意义:
  ①正常人用药后可见血游离钙轻度降低,但一般8小时之内可恢复正常。
  ②肾功能受损时忌用。
2.甲状旁腺激素(PTH)试验(Ellsoworth-Howard试验)
  方法:
  ①试验前患者服低磷饮食5天。
  ②试验前1日晨8时起收集尿液,每小时为1份标本,共4次。测基础cAMP和无机磷水平。
  ③试验日晨8时肌肉或静脉注射PTH200U~400U时间不短于10分钟,也可加入生理盐水静滴,持续1小时。9时起每30分钟收集尿液一次,共4份标本,测cAMP和无机磷。也可同时抽用药后1、2、4小时的血标本检查血cAMP。
  临床意义:
  ①正常人注射PTH后尿中磷酸盐排泄量,尿cAMP以及尿磷/悄、尿肌酐比值较基础值增加1倍。
  ②原发性甲旁亢时,无明显排泄增加。
  ③甲旁减时,尿cAMP和磷酸盐排泄和尿磷/尿肌酐比值明显增加,可达10倍以上。假性甲旁减时无尿中磷酸盐增加改变。
  注意事项:
  ①静脉滴注前需做过敏试验、激素与生理盐水按1:10稀释,抽取0.1ml皮下注射。
  ②注射PTH后可能出现恶心、呕吐或过敏等反应。
  ③此试验有一定的假阳性,需结合临床判断。
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